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CAR-T细胞生产

制备整合了嵌合抗原受体(CAR)并可感染人T细胞的慢病毒之后。从外周血中分离单个核细胞,然后用IL-2和CD3/CD28抗体偶联磁珠激活T细胞(ProMab#PM-CAR2002),激活后24小时和48小时用制备好的慢病毒感染。然后细胞间隔2-3天传代,以保持适当的细胞密度。从第8天开始,嵌合抗原受体(CAR)的表达可以通过流式细胞术检测,使用抗鼠或抗人Fab抗体(或者如果CAR被Flag标记的话,可使用抗Flag抗体)。到第12天,有足够的细胞来测试CAR的细胞杀伤活性和细胞因子诱导试验。

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